简介
载体构建是分子生物学研究中最常用的实验技术。本公司拥有一支经验丰富、优秀刻苦的分子生物学实验技术队伍。可根据您的实验要求为您完整各种载体的构建及改造。

实验步骤
(1)目的DNA片段和载体的制备；
(2)目的DNA片段和载体的连接；
(3)连接产物的转化；
(4)克隆筛选。

服务内容
1.以PCR为基础的各类载体构建，如细菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体；报道基因载体等；
2.基因突变，包括单点突变，多点突变，基因缺失等；
3.载体改造；
4.SIRNA载体和miRNA表达载体构建。

服务说明
1.客户提供载体构建及改造所需的实验方案，目的基因产物及序列（如果目的基因不好制备），载体（如果本公司载体库里没有）及相关背景资料。
2.若客户只提供组织、细胞等样本，还需提供目的基因NCBI登录号，本公司将额外收取RNA提取及逆转录费用。
3.对于表达载体、报道基因载体以及病毒载体等的构建，您需要提供序列资料、希望克隆到的载体、酶切位点等资料；
4.对于本公司已有的载体和模版，免费提供。

实验报告内容
1.含目的片段的质粒、含该质粒的细菌各一份；
2.引物序列、载体图谱一份、测序结果各一份；
3.载体构建实验所需试剂耗材、仪器设备、操作过程一份.

实验周期及收费标准：咨询本公司
（1）客户提供模板（若本公司无客户所需构建的载体质粒，则需要客户提供，或者另收载体改造的费用，按照改造元件数量进行收费），插入目的基因片段收费如下：
基因长度
价格
周期
3200bp
询价
2-4周

（2）若客户没有模板，则需另收基因调取的费用如下：
基因长度
价格
周期
2400
询价
1-2周

多个载体构建有优惠，具体请咨询客服！

一、慢病毒包装概述：
慢病毒（Lentivirus）载体是以人类免疫缺陷型病毒（HIV）为基础发展起来的基因治疗载体，能同时感染分裂分裂细胞和非分裂细胞，并且可以整合到细胞基因组中高效表达，慢病毒中的毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代，属于假型病毒。
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。将外源基因克隆进入表达载体，同时与包装质粒（表达病毒包装所需辅助蛋白）一起转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，收取培养基离心后可直接用于感染宿主细胞，当目的基因进入细胞后被整合到宿主基因组，从而高效表达目的基因。
二、慢病毒转染具有以下特点：
1.外源基因表达水平较高、表达稳定；
2.转染效率高，可感染分裂和不分裂的细胞，几乎可以感染所有类型的细胞，特别适合质粒载体转染效率低的细胞；
3.慢病毒基因容易操作，易于制备大量病毒且滴度高；
4.病毒基因组可整合到细胞基因组，易于构建稳定细胞株。
三、慢病毒包装服务内容：
1.客户提供插入片段信息；如序列、NCBI登录号等；
2.将目的片段克隆到慢病毒表达载体上；
3.慢病毒包装、扩增、滴度的测定；
4.实验报告提交。
四、客户提供：
1.客户提供慢病毒包装的实验方案；
2.若客户只提供组织、细胞等样本，还需提供目的基因NCBI登录号，本公司将额外收取RNA提取及逆转录费用；
3.对于本公司已有的载体和模版，免费提供。
五、实验报告内容：
1.含目的片段的慢病毒一份，可直接用于转染；
2.引物序列、载体图谱、测序结果各一份；
3.慢病毒包装实验所需试剂耗材、仪器设备、实验方法各一份。

一、腺病毒包装概述：
腺病毒(Adenovirus，Ad) 的基因组为线形双链DNA，长度约为36kb，被包装在一个二十面体的蛋白质外壳内，可分为编码区和非编码区，一般适用于治疗的高效控制系统。
腺病毒包装其主要原理是将目的片段克隆到腺病毒表达载体上，表达载体与腺病毒包装质粒通过重组后导入腺病毒包装细胞进行包装，包装好的病毒进一步进行扩增和滴度测定。目前较常用的系统如Ad Easy，Ad Max，以及invotrogen的穿梭系统。不同的包装系统其表达载体与包装载体发生重组的方式，场所都有所不同，如Ad Easy 系统是在细菌里发生重组的，重组的质粒线性化后转染细胞可包装成腺病毒，Ad Max系统表达载体与包装载体是在细胞中发生重组，invitrogen的穿梭系统则是体外重组。

二、与传统的转染方式相比，如脂质体转染、腺病毒感染具有以下特点：
1.可感染的细胞种类多，宿主范围广，几乎可以感染所有类型的细胞。
2.感染效率高，特别适合质粒载体转染效率低的细胞，如原代培养细胞，神经细胞等，且外源基因表达水平较高。
3.包装外源基因的片段大，高达10kb。
4.腺病毒载体构建及包装容易操作，易于制备出滴度高的大量病毒。
5.当腺病毒感染细胞后，病毒基因组存在于细胞染色体外，不整合到细胞染色体中，避免了因整合引起的基因突变及激活致癌基因，生物安全性高。

三、腺病毒包装服务内容：
1.客户提供插入片段信息；如序列、NCBI登录号等；
2.将目的片段克隆到腺病毒表达载体上；
3.腺病毒包装、扩增、滴度的测定；
4.实验报告提交。

四、客户提供：
1.客户提供腺病毒包装的实验方案；
2.若客户只提供组织、细胞等样本，还需提供目的基因NCBI登录号，本公司将额外收取RNA提取及逆转录费用；
3.对于本公司已有的载体和模版，免费提供。

五、实验报告内容：
1.含目的片段的腺病毒一份，可直接用于转染；
2.引物序列、载体图谱一份、测序结果各一份；
3.腺病毒包装实验所需试剂耗材、仪器设备、操作过程一份。

本公司开展的质谱服务有：2D斑点、SDS-page条带及其它来源的（包括复杂混合物）蛋白多肽鉴定；蛋白质多肽分子量测定；各类修饰位点鉴定；蛋白测序；切割位点鉴定；蛋白与核酸、金属结合区域的检测。
质谱分析服务说明
1.送样须知
2.所用仪器、耗材、参数及操作过程（参见质谱分析样本准备）
3.结果提交
一级质谱：质谱图、肽段分子量、数据库检索结果
二级质谱：质谱图、肽段分子量、数据库检索结果、肽段氨基酸序列、修饰位点等；
4.收费标准
胶内酶切与肽段纯化
MALDI-TOF-MS检测分子量
MALDI-TOF-MS/MS单个蛋白鉴定
LTQ对复杂混合物鉴定
LTQ对修饰位点鉴定
LTQ对蛋白测序
LTQ对切割位点鉴定
LTQ对蛋白与核酸、金属结合区域的检测
批量处理或蛋白质整套服务请询价。
5.欢迎登陆本公司网站：www.fitgene.com

辉骏生物已成功为各地科研单位服务超过3000张双向电泳凝胶，数据发表在权威专业杂志Proteomics. 上。
一、概述
双向电泳是利用蛋白质的等电点和分子量不同而分离蛋白质： 等电聚焦根据蛋白质的等电点不同将蛋白质分离，十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳，利用蛋白质的分子量大小不同将蛋白质分离。
二、双向电泳分离蛋白质混合物的优势
应用范围广、适用于各类材料；
可大规模多个样本筛选和分析。
三、服务流程
四、服务内容
样本制备与定量；
双向电泳与图片分析；
蛋白质斑点质谱鉴定；
双向电泳实验报告提交。
五、送样须知
运输要求：液氮或干冰保存寄送。
注：样本应避免各类污染和反复冻融。
六、实验报告内容
双向电泳电子图片及定量分析结果：差异点号码、差异倍数；
差异点的一级质谱或二级质谱峰图，质谱鉴定结果，包括pI和MW等；
双向电泳完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。
七、实验案例
八、周期及收费标准：欢迎登陆www.fitgene.com
九、质量承诺：
为您提供严谨的双向电泳实验设计方案；
预实验不满意不收费。

一、Western blot概述
采用变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分离蛋白质混合物，经过分离的蛋白质被到转移到固相支撑物（NC膜，PVDF膜等）上后，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,经过底物显色以检测特异蛋白质表达水平。
由于Western blot检测技术具有简便，快捷等特点，所以目前该技术也被广泛应用于蛋白质表达水平的检测。
二、技术服务服务内容
蛋白质抽提与定量；
Western blot
图片分析；
Western blot实验报告提交。
三、送样须知
顾客提供：组织、细胞、蛋白质溶液等；一抗（如果公司抗体库里没有）。
运输要求：干冰或液氮包装寄送。
注：样本应避免各类污染和反复冻融。
四、实验报告内容
Western blot蛋白质浓度及电泳上样量；
原始胶片和电子图片、图片分析结果；
Western blot完整的实验报告,包括实验步骤、使用仪器和试剂等。
五、实验案例
六、服务周期及收费标准: 欢迎登陆www.fitgene.com
七、服务质量承诺：利用内参精确定量，并提供清晰、客观的western结果。

辉骏生物具有三年SILAC服务经验，顾客发表在权威期刊J.Proteome Res.上的主体数据出自本公司，提供Arg和Lys的L、M、H三种同位素氨基酸。
一、SILAC概述
即细胞培养条件下稳定同位素标记技术
二、SILAC的优势:
高通量；
定量精确；
线性定量范围广；
灵敏度更高；
体内标记技术，更接近样品真实状态。
三、SIALC服务流程
四、SILAC服务内容
细胞同位素标记；
样本制备与定量；
SDS-PAGE分离；
胰酶酶切后液相分离和质谱分析；
数据库检索；蛋白质定量分析；
相关生物信息学分析；
实验报告提交。
五、送样须知
运输要求：液氮或干冰保存寄送。
注：样本应避免各类污染和反复冻融。
六、实验报告内容
蛋白定鉴定和SILAC定量分析结果；
顾客指定蛋白质对应的质谱峰图；
SILAC实验完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。
七、SIALC技术服务案例
八、服务周期及收费标准：热线 400-699-1663
十、质量承诺
确保定量分析结果可靠；
客观的SILAC实验分析结果。

一、shotgun是先将蛋白溶液或经SDS-PAGE分离的蛋白条带酶切消化成肽段混合物，肽段混合物经高效液相色谱分离形成较简单的组分，然后将其在线或离线导入高分辨率质谱仪中进行质量分析。质谱仪会选取某些肽段进行再次破碎（即二级质谱），得到更小的氨基酸序列片段。优质的检索软件根据二级质谱信息与相应的数据库匹配，可得到肽段的确切序列，进而拼接成混合物中各蛋白质的完整序列，从而鉴定各蛋白质。
二、shotgun LC-MS质谱鉴定技术优势
1、高通量；
2、兼容性强；
3、自动化程度高；
三、shotgun LC-MS质谱鉴定技术服务内容
四、寄送要求：蛋白质条带和干粉可用冰袋包装寄送，蛋白质溶液需用干冰或液氮包装寄送。
五、实验服务报告内容
1、蛋白质质谱鉴定结果和质谱峰图；
2、shotgun LC-MS质谱鉴定的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。
六、实验服务周期及收费标准：咨询本公司
七、质量承诺：提供客观可靠的shotgun LC-MS质谱鉴定实验结果。
八、欢迎索取顾客在辉骏生物提供的shotgun LC-MS质谱鉴定技术服务所发表的样板文章。

辉骏生物在液相途径的蛋白质组学方面具有强大的实力和丰富的经验，已为各地科研单位提供数十例iTRAQ技术服务。
一、iTRAQ概述
iTRAQ定量分析蛋白质是利用iTRAQ试剂与氨基酸末端氨基及赖氨酸侧链氨基连接而标记上肽段,经过色谱分离，可以鉴定出蛋白质和分析出同一蛋白质不同处理的定量信息。
二、iTRAQ试剂结构
iTRAQ试剂包括三部分：报告、肽反应、平衡部分
三、iTRAQ具有以下技术优势
1、灵敏度高；2、分离能力强；3、高通量；4、结果可靠；5、自动化程度高。
四、iTRAQ技术服务流程
五、iTRAQ技术服务内容
1、样本制备与定量；iTRAQ试剂标记；
2、液相分离和质谱分析；数据库检索；
3、蛋白质定量分析；
4、相关生物信息分析；
5、实验报告提交。
六、送样须知
运输要求：液氮或干冰保存寄送。
七、iTRAQ实验报告内容
八、iTRAQ实验服务案例
九、服务周期及收费标准：欢迎登陆www.fitgene.com
十、服务质量承诺
1、本公司将为您提供严谨的iTRAQ实验设计方案
2、提供客观的iTRAQ实验分析结果。

辉骏生物已成功为各地科研单位服务超过3000张双向凝胶电泳，数据已发表在权威专业杂志Proteomics.上。
一、DIGE概述
DIGE — 双向荧光差异凝胶电泳主要是利用蛋白质的等电点和分子量的差异来分离蛋白质混合物，同时应用荧光染料的灵敏度及内标的使用等技术，使其在定量蛋白质组学的研究中效果明显优于传统双向电泳。
二、DIGE具有以下优势：
1、灵敏度高；
2、高效性；
3、线性范围更广；
4、定量精确；
5、统计学分析,降低了操作者之间的偏差。
三、DIGE技术服务流程
四、DIGE技术服务内
1、样本制备与定量；
2、荧光标记；
3、双向电泳和图片分析；
4、DIGE实验报告提交。
五、送样须知：样本应避免各类污染和反复冻融。
六、实验报告内容
1、DIGE荧光电子图片；
2、蛋白质点定量分析结果，；
3、完整实验报告。
七、DIGE实验案例
八、服务周期及收费标准：欢迎登陆 www.fitgene.com
九、质量承诺：
1、cy2作为内标，确保定量的准确；
2、提供客观的DIGE实验分析结果。