上海闪晶分子生物科技有限公司
| 企业简介: |
上海闪晶生物科技有限公司2004年成立于上海,是一家长期致力生物医药研发外包服务的公司.
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商机面向地区: |
上海
松江
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发布日期: | 2023年5月26日 |
供求信息分类: |
化工 实验室用品 |
更新日期: | 2023年7月5日 |
供求信息描述: |
步骤1. 目标基因全基因合成: 从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。如果我们的cDNA文库中有这个基因,我们免费提供给客户。 根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化,密码子优化。 合成设计好的基因序列。 提供给客户:目标基因(在T载体或常规穿梭载体上)及测序报告。 价格:3.80元/碱基,如果客户直接提供构建好的质粒,则免去这部分费用. 时间:2~3周,根据基因的大小而定.详见全基因合成服务 步骤2. 目标基因亚克隆:
扩增并抽提含有目标基因的载体质粒。 将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。 测序验证构建质粒的准确性。 闪晶生物免费提供如下表达载体: 提供给客户:正确构建的重组表达质粒,含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。 价格:免费 时间:1-2周 步骤3. E. coli表达菌株转化及筛选: 扩增并抽提构建好的表达质粒。 将表达质粒转化到高效的E.Coli表达菌株中。 至少挑选5个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。 SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况,并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。 可提供表达菌株:DH5α, Top10, JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami。 提供给客户:重组质粒的表达菌株及表达检测报告。 价格:免费 时间:1周 步骤4. 目标蛋白表达及纯化: 摇瓶培养1L重组细菌,诱导表达目标蛋白。 通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。 利用蛋白酶去除不需要的纯化标签,再纯化获得所需的目标蛋白(可选,构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点)。 通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。 通过Western-blot验证目标蛋白正确性。 提供给客户:纯化好的目标蛋白1~5mg及纯化报告 |
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